IPHASE Alkaline Comet assay kit
彗星試驗(yàn)
體內(nèi)堿性彗星試驗(yàn)在化合物遺傳毒性評(píng)價(jià)中的應(yīng)用日益廣泛。ICH S2(R1)已將肝臟彗星試驗(yàn)列為第2個(gè)組織/終點(diǎn)的體內(nèi)試驗(yàn);體內(nèi)哺乳動(dòng)物堿性彗星試驗(yàn)的指導(dǎo)原則(TG489)也已頒布。體內(nèi)堿性彗星實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驒z測(cè)DNA鏈斷裂、堿性不穩(wěn)定位點(diǎn)、不完整切除修復(fù)引起的DNA鏈的斷裂等任何感興趣,能夠制成合適細(xì)胞懸液的組織DNA損傷。與其他試驗(yàn)相比其檢測(cè)的是單細(xì)胞水平的DNA損傷,因此該試驗(yàn)敏感性較高,操作簡(jiǎn)單,經(jīng)濟(jì)省時(shí)。
彗星實(shí)驗(yàn)(comet assay)也稱單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)(single cell gel electrophoresis.SCGE),是一種有效評(píng)估DNA損傷的方法。其原理是器官或組織經(jīng)處理(如輻射、重金屬等)后,細(xì)胞中的DNA發(fā)生單鏈或雙鏈斷裂,經(jīng)細(xì)胞及其核膜裂解后,DNA解旋,在電場(chǎng)作用下,DNA 斷片遷移出細(xì)胞核,形成彗星狀的電泳圖譜。正常細(xì)胞的大分子DNA在電場(chǎng)作用下遷移距離較短,DNA仍保留在細(xì)胞核的范圍,形成圓形或輕微拖尾的圖譜。根據(jù)電泳緩沖液的pH值不同,可分為中性彗星實(shí)驗(yàn)(pH=8.4)和堿性彗星實(shí)驗(yàn)(pH>13)。中性彗星實(shí)驗(yàn)主要用于檢測(cè)DNA雙鏈的斷裂損傷,堿性彗星實(shí)驗(yàn)具有更高的靈敏性,可用于檢測(cè)更少量的單鏈和雙鏈斷裂損傷。 需要注意的是,試驗(yàn)過程中的個(gè)方面,包括樣品準(zhǔn)備、電泳條件、視覺分析參數(shù)(如染色強(qiáng)度、顯微鏡光強(qiáng)度以及使用顯微鏡濾鏡和相機(jī)動(dòng)態(tài)和環(huán)境條件(如背景照明)已經(jīng)被研究,可能影響DNA遷移。
彗星試驗(yàn)試劑盒
北京匯智泰康醫(yī)藥技術(shù)有限公司針對(duì)堿性彗星試驗(yàn)開發(fā)試劑盒,本試劑盒省去了試驗(yàn)溶劑配制、溶膠配制不穩(wěn)定等時(shí)間,可以直接使用,大大縮短了實(shí)驗(yàn)周期;試劑盒各成分均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè),符合堿性彗星試驗(yàn)要求,實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性高。堿性彗星試劑盒應(yīng)用廣泛,可進(jìn)行食品與飲用水、化學(xué)品、洗滌劑、消毒劑、食品添加劑、藥物殘留、化妝品、容器與包裝材料等多個(gè)方面的遺傳毒理學(xué)檢測(cè)。
【試驗(yàn)原理】
DNA 分子在內(nèi)源性或外源性的 DNA 損傷因子作用下可能會(huì)出現(xiàn)鏈斷裂,將單個(gè)核細(xì)胞包埋于瓊脂糖凝膠中,細(xì)胞經(jīng)裂解和解旋后,在電場(chǎng)作用下,DNA 片段向正極遷移,移動(dòng)的距離與 DNA 片段的相對(duì)分子質(zhì)量和電荷數(shù)相關(guān)。經(jīng)熒光染料染色后可在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察,若細(xì)胞未受損傷,經(jīng)熒光染色后呈圓形的熒光團(tuán),無拖尾現(xiàn)象;若細(xì)胞受損,則可觀察到彗星樣的圖像,根據(jù)彗星拖尾長(zhǎng)度及熒光強(qiáng)度可進(jìn)行 DNA 損傷分析。
【產(chǎn)品說明】
本試劑盒提供了單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)需要的試劑和耗材。
適用范圍
(1)食品、化妝品、藥品、保健品、醫(yī)療器械和化學(xué)品等的遺傳毒性的初篩
(2)檢測(cè)DNA損傷引起的基因突變,通過檢測(cè)受試物在測(cè)試菌株某些特殊構(gòu)建的突變體上引起突變的能力,即造成菌株從組氨酸/色氨酸依賴型向原養(yǎng)型突變,判斷受試物是否為致突變劑
(3)本產(chǎn)品僅供科研使用
匯智泰康是一家位于中美兩地的生物醫(yī)藥合同研發(fā)機(jī)構(gòu),整合中美兩地的藥物研發(fā)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),基于AAALAC、GLP、ISO/IEC 17025實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證,面向全球企業(yè)及研發(fā)機(jī)構(gòu)提供分析化學(xué)、DMPK、藥理藥效、生物學(xué)、以及毒理安全性評(píng)價(jià)產(chǎn)品與服務(wù)。
遺傳毒性其他產(chǎn)品:
遺傳毒性Ames預(yù)實(shí)驗(yàn)試劑盒
遺傳毒性Ames試劑盒
微量波動(dòng)Ames試驗(yàn)(Mini-Ames)試劑盒
Ames菌株鑒定試劑盒
大鼠肝S9活化系統(tǒng)
體外染色體畸變?cè)噭┖?/span>
TK基因突變?cè)噭┖?/span>
HGPRT基因突變?cè)噭┖?/span>
彗星試驗(yàn)試劑盒
體外微核試驗(yàn)試劑盒
誘導(dǎo)混合SD大鼠肝S9
中國(guó)倉鼠肺細(xì)胞(CHL) ——體外染色體畸變?cè)囼?yàn)
小鼠淋巴瘤細(xì)胞 L5178Y TK+/-clone(3.7.2C) ——TK 基因突變?cè)囼?yàn)
中國(guó)倉鼠肺細(xì)胞株(V79) ——HGPRT 基因突變?cè)囼?yàn)
葡萄糖-6-磷酸
輔酶Ⅱ
ADME服務(wù)項(xiàng)目
肝微粒體代謝穩(wěn)定性(人,猴,犬,大鼠,小鼠)
肝細(xì)胞代謝穩(wěn)定性試驗(yàn)(人,猴,犬,大鼠,小鼠)
代謝表型研究
代謝產(chǎn)物鑒定
代謝途徑鑒定
種屬比較研究
CYPP450抑制實(shí)驗(yàn)(CYP1A2,CYP2A6,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1,CYP3A4)
CYPP450誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)
血漿蛋白結(jié)合率測(cè)定
血漿穩(wěn)定性試驗(yàn)
跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)試驗(yàn)
藥物-藥物相互作用
毒理學(xué)研究
ADME相關(guān)產(chǎn)品:
Ⅰ相代謝穩(wěn)定性試劑盒
Ⅱ相代謝穩(wěn)定性試劑盒
CYP450 酶代謝表型研究試劑盒(化學(xué)抑制法/7種抑制劑)
CYP450 酶代謝表型研究試劑盒(重組酶法/7種酶)
CYP450 酶代謝表型研究試劑盒(重組酶法/單酶)
酶抑制(IC50)研究試劑盒(7種特異性底物)
酶抑制(IC50)研究試劑盒(單個(gè)酶)
NADPH再生系統(tǒng)
UGT孵育系統(tǒng)
0.1M PBS
肝微粒體(人,猴,犬,大鼠,小鼠)
肝S9(人,猴,犬,大鼠,小鼠)
肝原代細(xì)胞(人,猴,犬,大鼠,小鼠)
CYP450(CYP1A2,CYP2A6,CYP2B6,CYP2C8,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1,CYP3A4)
UGT酶
探針底物,代謝產(chǎn)物,抑制劑(CYP1A2,CYP2A6,CYP2B6,CYP2C8,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1,CYP3A4)